歐盟Sanco 10597/2003最新版中第二階段Tier II原藥等同性評審資料要求要點如下：

1. 對于新雜質(zhì)或超標(biāo)雜質(zhì)≥0.1% – <1%：只需要艾姆斯Ames實驗；

2. 對于新雜質(zhì)或超標(biāo)雜質(zhì)≥1%：需要3種體外遺傳毒理實驗,并且根據(jù)情況考慮以下實驗：

a) 急性經(jīng)口毒性Acute oral;

b) 皮膚致敏性Sensitization;

c) 發(fā)育毒性Developmental study;

d) 神經(jīng)毒性Neurotoxicity study;

3. 對于新雜質(zhì)或超標(biāo)雜質(zhì)≥5%：考慮28天或90天重復(fù)劑量橋?qū)嶒灮蚱渌鼘嶒灐?/P>

聯(lián)合國糧農(nóng)組織FAO

FAO農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)手冊中原藥等同性評審Tier II資料要求于2018年進(jìn)行了修訂,主要內(nèi)容如下：

• 隨著新的OECD測試指南和GHS分類的實施,急性經(jīng)口和經(jīng)皮實驗通常會給出范圍而不是數(shù)字的結(jié)果。在這種情況下,參考產(chǎn)品和新來源原藥之間的急性毒性值的比較可能不適用。例如,如果參考產(chǎn)品急性經(jīng)口致死中量LD50為87mg/kg bw,而新來源原藥 LD50為50-300mg/kgbw,則無法進(jìn)行比較。

• 如果某雜質(zhì)不引起急性或短期毒性,在實驗中該雜質(zhì)可能會被忽略。例如,氟啶胺雜質(zhì)5的神經(jīng)毒性只在28天或90天的實驗中出現(xiàn)；

• 因此,Tier II毒理學(xué)等同資料要求修改如下：

1. 艾姆斯Ames study；

2. 考慮眼睛刺激性、皮膚刺激性、皮膚致敏性、28天或90天重復(fù)劑量實驗；

3. 除Ames外的其他遺傳毒性；

4. 并考慮繁殖、發(fā)育、致癌性、神經(jīng)毒性等；

巴西Brazil

巴西衛(wèi)生部RDC 294/2019 原藥等同性評審Tier II資料要求的要點如下

1). 對于新雜質(zhì)或超標(biāo)雜質(zhì) ≥0.1% – 1%：考慮3項體外遺傳毒理實驗

1. Ames;

2. 體外哺乳動物細(xì)胞基因突變實驗Gene mutation study in vitro inmammalian cells; 以及

3. 體外哺乳動物細(xì)胞染色體損傷實驗Chromosomal damage study in vitro inmammalian cells

2). 對于新雜質(zhì)或超標(biāo)雜質(zhì)≥1%：考慮如下實驗

1. Ames;

2. 體外哺乳動物細(xì)胞基因突變實驗Gene mutation study in vitro inmammalian cells;

3. 體外哺乳動物細(xì)胞染色體損傷實驗Chromosomal damage study in vitro inmammalian cells;

4. 體內(nèi)體細(xì)胞染色體損傷實驗In vivo chromosomal damage study insomatic cells;

5. 急性經(jīng)口毒性實驗Acute oral toxicity study;

6. 眼睛腐蝕/刺激性實驗Eye corrosion/irritation study;

7. 腐蝕/皮膚刺激性實驗Corrosion/Skin irritation Study; 以及

8. 皮膚和呼吸道致敏實驗Skin and respiratory sensitization study

總結(jié)及建議：

歐盟Sanco 10597 要求在出現(xiàn)新雜質(zhì)或超標(biāo)雜質(zhì)≥1% 時進(jìn)行3項體外遺傳毒性實驗,而巴西的RDC 294要求在新雜質(zhì)或超標(biāo)雜質(zhì)≥0.1 – 1%時進(jìn)行。3項體外遺傳毒性實驗是否應(yīng)自動觸發(fā)或根據(jù)指定的雜質(zhì)情況考慮按需要進(jìn)行是可以討論的,最終由巴西登記機(jī)關(guān)當(dāng)局決定；

推薦以下3種方案來安排原藥等同性登記所需的毒理學(xué)實驗：

首先需要重新考慮所謂的傳統(tǒng)急毒6項+致突變2項(Ames和體內(nèi)微核)實驗,已經(jīng)不再適用于目前原藥等同性評審第二階段的毒性資料要求。

基于登記提交者/原藥工廠對于擬申請原藥等同性評審的產(chǎn)品其生產(chǎn)工藝/雜質(zhì)情況的了解程度,毒理實驗的安排可以考慮以下三種方案：

1. 先完成Tier I 評估并根據(jù)評審結(jié)果給出了Tier II 毒理學(xué)數(shù)據(jù)要求時再去安排毒理學(xué)實驗。評估會出現(xiàn)兩種結(jié)果：1.化學(xué)等同順利通過,不需要提交毒理資料；2.化學(xué)不等同,需要按照雜質(zhì)情況補(bǔ)交相應(yīng)的毒理報告,這時要注意毒理實驗所需的樣品是否有代表性,假如五批次實驗中用過的樣品批次已經(jīng)過期,毒理實驗新批次樣品需要補(bǔ)做單批次的定性定量雜質(zhì)分析,以證明該樣品與五批次樣品規(guī)格一致。

   
   

2. 做五批次實驗時,同時或隨后安排 3項體外遺傳毒性實驗(用五批次實驗中的某一批樣品)。這種情況適用于已知自家產(chǎn)品可能的新雜質(zhì)或超標(biāo)雜質(zhì)小于1%。此方案能夠滿足歐盟和巴西的登記要求,且不用擔(dān)心幾年后才安排毒理實驗時原五批次樣品過期。

   
   

3. 做五批次實驗室時,考慮安排所有相關(guān)的毒理學(xué)實驗(用五批次實驗中的某一批樣品)。適用于對自家產(chǎn)品不了解或已知會有雜質(zhì)大于1%的情況,不用擔(dān)心幾年后才安排毒理實驗時五批次樣品過期,且能滿足歐盟和巴西的登記要求。

另外,由于很多公司的產(chǎn)品目標(biāo)市場不僅限于巴西和歐盟,常規(guī)6項急毒實驗報告在很多國家都是硬性的登記要求,因此無論選擇以上3種方案中的哪種,都不影響急毒6項實驗在五批次實驗進(jìn)行時同時安排。因此b方案和c方案的最后區(qū)別僅在于是否考慮體內(nèi)體細(xì)胞染色體損傷實驗的安排。