行業(yè)資訊

    6月5日,據(jù)福建檢驗檢疫局透露,該局自主研發(fā)的“轉(zhuǎn)基因大豆2704-12(品系)的LAMP檢測引物及方法”獲國家發(fā)明專利授權(quán),這是福建檢驗檢疫局自主研發(fā)的的并在轉(zhuǎn)基因檢測領(lǐng)域獲得的首個專利。目前,這項技術(shù)已作為檢驗檢疫行業(yè)標準(SN/T 3767.15-2014),在國內(nèi)轉(zhuǎn)基因大豆檢測中進行推廣應用。

    據(jù)福建檢驗檢疫局相關(guān)專家介紹,轉(zhuǎn)基因大豆2704-12品系是國家農(nóng)業(yè)部批準允許進口,并在進口時必須開展符合性驗證檢測的一種品系。國內(nèi)外還未見轉(zhuǎn)基因大豆2704-12品系LAMP檢測引物及方法的報道。此次福建檢驗檢疫局自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因大豆檢測方法,首次設計、篩選到了轉(zhuǎn)基因大豆A2704-12品系的LAMP檢測引物,并建立普遍適用于基層實驗室的轉(zhuǎn)基因大豆2704-12品系LAMP檢測方法。

    該方法具有高效、簡便、高特異性等特點:

    一是高效：LAMP方法只需要恒溫就能完成擴增反應,沒有PCR反應中那樣循環(huán)溫模板的變性、退火、復性過程,因此可將PCR法的2-3小時的擴增時間縮短至約1小時,即能擴增出109~1010倍靶序列拷貝,DNA產(chǎn)量高達500ug/mL,且能檢測到的拷貝數(shù)低至PCR檢測限的1/10。

    二是簡便：因LAMP的恒溫擴增和產(chǎn)物直觀檢測的特點使其只要一個簡單的恒溫器,無需昂貴的檢測設備,有利于對現(xiàn)場檢測或基層實驗室推廣應用。

    三是高特異性：采用六個區(qū)段、六條引物對靶DNA序列進行擴增,決定了LAMP法的特異性高于只用1對引物進行擴增的PCR法。

    據(jù)悉,目前檢測轉(zhuǎn)基因特異品系的方法主要有普通PCR方法和實時熒光定量PCR方法。普通PCR方法耗時長,操作繁瑣,靈敏度不夠,容易交叉污染,質(zhì)控復雜,假陽性、假陰性比例偏高。實時熒光定量PCR方法靈敏度高,但成本昂貴,技術(shù)要求高,且必須使用大型儀器設備。

    此次福建運用LAMP這種新穎的恒溫核酸擴增方法,在轉(zhuǎn)基因特異品系檢測領(lǐng)域有效建立了普遍適用于檢驗檢疫一線基層實驗室的快速、簡便、高效的轉(zhuǎn)基因品系檢測方法,檢測成本遠低于熒光定量PCR。